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靶向结肠癌SW620细胞ZEB2-shRNA重组体构建及功能研究

作者:小编2024-12-30 10:48:45

  A B S T R A C T Ob j e c t i v e : T o c o n s t r u c t z i n c - f i n g e r Kb o x b i n d i n g h o me o b o x 2 ( Z E B 2 ) s h o r t h a i r p i n R NA( s h R NA)a n d o b —

  关键词 结直肠肿瘤 E盒 结 合 锌 指 蛋 白 2 R NA 干 扰 中图 分 类 号 : R7 3 5 . 3 5 文 献 标 识 码 : A d o i : 1 0 . 1 9 3 8 1 / j . i s s n . 1 0 0 1 — 7 5 8 5 . 2 0 1 6 . 2 3 . 0 0 2

  s e r v e t h e g r o wt h c h a r a c t e r i s t i c s o f S W6 2 0 c o l o r e c t a l c a n c e r c e l l s a f t e r s h RNA- me d i a t e d ZE B2 g e n e s i l e n c i n g . Me t h o d s : I n t e r f e r e n c e p l a s mi d s h Z EB2 s l o w v i r u s i n f e c t e d c e l l s t a r g e t t O ZE B2 g e n e s wa s c o n s t r u c t e d b y p I VX— s h RNA2 v e c t o r , s t a b l y t r a n s f e c t e d c e l ll i n e s we r e s c r e e n e d b y G4 1 8. RT- P CR a n d We s t e r n b l o t we r e u s e d t O d e t e c t ZE B2 e x p r e s s i o n i n

  D E N G Y a n , F A N G H u i q i , wU Ho n g y i n g . D e p a r t me n t o /G a s t r o e n t e r o l o g y, Xi a me n Ha i c a n g Ho s p i t a l , Xi a me n C i t y,

  S W6 2 0 c e l l s o n t h e l e v e l s o f Ge n e s a n d p r o t e i n r e s p e c t i v e l y . Th e c h a r a c t e r i s t i c s o f Z EB2 一 s h RNA t r a n s f e c t e d S W6 2 0 c e l l s we r e a n a l y z e d f r o m t h e a s s a y s o f c o l o n y f o r ma t i o n, wo u n d h e a l i n g a n d t u mo r i g e n i c i t y i n n u d e mi c e , r e s p e c t i v e l y .

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  靶 向结肠 癌 S W6 2 0细 胞 Z E B 2 一 s h R NA 重 组 体 构 建 及 功 能研 究

  Co ns t r u c t i o n o f Ta r g e t i n g ZEB2 - s hRNA Re c o mb i na nt a nd I t s Fu nc t i o naI Re s e a r c h i n Col o r e c t a l Ca nc e r S W 6 2 0 Ce l l s

  摘 要 目的: 利用 R NA干扰技术 , 降低结肠癌 S W6 2 0细胞 中 E盒结合锌指蛋 白 2 ( Z E B 2 ) 基因 的表 达 , 观察 Z E B 2 低 表达对 S W6 2 0细胞 的生长影响 。方法 : 用 p I VX - s h R NA 2载体构建针对人 Z E B 2 基 因的干扰 质粒 s h Z E B 2慢病毒感 染细胞 , G 4 1 8 筛选稳 定转 染细胞株 , 通过 RT P C R和 We s t e r n b l o t 检测 Z E B 2在 S W6 2 0细胞 中表达 。采用 克隆形成 检测转染细胞克隆能力 , 划痕试验检测转染细胞 的迁移 力 , R T - P C R检 测转染 细胞 Z E B 2基 因表达水 平 , 致瘤试 验检 测转染细胞在裸 鼠的致瘤性 。结果 : 成功 构建 s h z E B 2稳 定转 染 的细胞 株 , s h Z E B 2 一 S W6 2 0内 Z E B 2表 达下 降 , 导致 s h Z E H 2 一 S W6 2 0在细胞克隆能力 、 迁移力及致瘤性方面均下 降( P <0 . 0 5 ) 。结论 : 用 R NA 干扰技术 可 以靶 向降低结 肠癌细胞株 S W6 2 0内 Z E B 2的表 达 , 使其致瘤性降低 , 提示 Z E B 2 可作 为分 子靶 点用于结肠癌靶 向治疗 。